CELL-WISE 293培养基CW001产品,这是2026年版的使用指南。这个品牌的培养基主要是用于瞬时转染,特别适合HEK293细胞高密度悬浮培养。它是无蛋白、无动物源、化学成分限定的产品,你直接拿来用就成,不用额外添加别的东西。这个培养基看起来是澄清透明的红色液体,渗透压大约在275±15 mOSM之间,pH值在6.9到7.4之间。内部无菌检测没问题,内毒素含量还不到5 EU/mL。平时把它放在2到8摄氏度的环境下避光保存就行,保质期12个月。产品用途是用来做科学研究,别用来给人或动物治病诊断啊。 说到使用方法,其实细胞驯化分直接驯化和渐进式驯化两种。直接驯化就是如果你原本是用别的培养基养的细胞,直接换成Balance CD 293 medium就行,按你平常传代稀释的方法来换就行了。 那渐进式驯化就要稍微麻烦一点了。记得选那种代数低一点的细胞来弄啊,先在原来的培养基里把细胞复苏回来再传代两三次,等细胞长稳了密度到了2×10 6 cells/ml的时候再换。换的时候细胞密度要控制在0.5到0.6×10 6 cells/mL,这时候给Balance CD 293培养基和传统的5到10%血清培养基按照75:25的比例混合着用。把它们放到37摄氏度、5%的CO2环境下的摇床里晃悠就行,转速在110到175 rpm之间。 大概过个三到四天细胞密度达到3×10 6 cells/ml,活率也高于90%的时候再换一次培养基。这次把比例改成50:50,还是按老规矩把细胞放回去晃悠。要是这时候发现细胞长得慢了点,也别着急,可以先把上清液离心倒掉留个20%,再加入80%的混合液接着养。混合液还是按5到10%血清培养基和Balance CD 293按75:25的比例配成的。 接下来重复刚才的步骤一步步增加Balance CD 293的比例直到变成100%的样子。等你在100%的这种培养液里传了几次代之后(一般传个2到3次),过个三到四天就能看到密度能达到2到3×10 6 cells/mL,活率也超过90%了,这就说明你的细胞已经适应了这种环境。 这之后再养的时候起始密度就可以降到0.3×10 6 cells/mL了。不过一般来说驯化过程中前三代的状态可能差点意思,但从第四代开始通常会有改善。