最近啊,流式细胞术又有新突破了,大家有没有听说啊?你知道吧,研究细胞凋亡的时候,经常用Annexin V结合碘化丙啶(PI)这个方法。可这方法确实存在不少问题。比如,固定细胞的时候荧光信号容易减弱,PI这个染料又要活细胞才行。 搞到最后呢,不仅结果不准确,样本还不能放太久,一旦超过时间结果就飘了。还有呢,像结核分枝杆菌感染的样本直接拿上来分析太危险了。不过呢,2017年有个研究给我们提了个醒,他们提出了FAN(Fixed Apoptotic/Necrotic)法。 这个方法呢,把Annexin V换成了抗磷脂酰丝氨酸(PS)抗体,这样就不用依赖钙离子了。还有呢,用胺反应活力染料(ViD)替代PI,这样固定之后信号就稳定了。FAN法对不同的细胞类型和凋亡诱导剂都做了验证,结果还和传统方法一致呢。 更厉害的是这个方法的样本保存能力。经过处理后,在4℃或者室温避光下可以保存两周之久。这对那些要进行批量、远程分析或者回顾性研究的人来说太方便了。 而且呢,FAN法还可以把病原体固定住,还能顺带检测胞内菌载量、TNF-α还有MHC-II这些指标呢。这个技术让流式细胞术在临床上和基础研究上应用更广了。 总之啊,FAN法解决了Annexin V和PI很多局限。对于我们这些搞研究的来说真是一大进步啊。