微生物分离与接种全流程图解。 把混合的微生物样品给倒在固体培养基表面,用接种环重复画圈。每画一圈,把混杂的细菌变成一个个单菌落。要操作方便些,培养基厚度适宜,大概一皿20毫升,表面光滑没有气泡。这个过程称为平板划线分离法。 1.1 ◇ 连续划线法——“一条线走到黑”:用接种环在酒精灯外焰烧得通红,在平板边缘轻轻地刮一下冷却。接着从平板边缘开始画波浪线,一直画到另一边。线条要平行密集,前后不能重叠。画完后再把接种环烧红,盖上盖子,倒置培养。 1.2 ◇ 分区划线法——“四宫格”锁死目标:把平板平均分成四区,第四区面积最大。从第一区开始每次画3到5条平行线,取出接种环尖端、烧红、冷却后,再以上次菌落为起点向第二个区画线。这样一直下去,每个区都完成了。把接种环烧红后倒置培养。 左手握住两支试管,使斜面朝上。右手握住像毛笔一样的接种环,先过火灭菌后再烧灼其他部位。两个试管上端并齐并通过火焰后,用小指和掌心夹住试管塞拔出。沾取一些菌苔后迅速抽出并在空白斜面上划线接种。接好后再过火灭菌塞回棉塞。 用一根经过火焰灭菌的针穿过固体培养基中心至底部。然后沿着原路线拔出针并平行管壁插入斜面上部。整个过程要保持手稳定且动作快速无菌。 移液管吸取菌液直接接种到液体培养基中,或者用冷却后的接种环取菌液研磨均匀悬浮后接种到液体培养基中。 如果用半固体培养基观察细菌动力表现的话:把接种针冷却后沾取菌液垂直插入半固体中心至接近底部但不触底处退出即可。 用移液管吸取0.1毫升菌悬液滴在平板中央后用涂布棒均匀地涂布在整个平板上倒置培养即可快速获得高密度均匀分布的菌落。